產(chǎn)品特點(diǎn):
1、 使用方便:不需昂貴設(shè)備。
2、 可以處理各種細(xì)菌菌體，包括新鮮菌液和冰凍菌體。
3、 將蛋白提取的時(shí)間縮短至30分鐘-1小時(shí)。
4、 采用溫和的中性裂解組分，保持蛋白活性。
5、 含蛋白穩(wěn)定劑，提取的蛋白穩(wěn)定。
6、 紫外檢測蛋白濃度時(shí)，背景干擾低。
7、 蛋白酶抑制劑抑制了蛋白的降解，蛋白酶抑制劑配方優(yōu)化。蛋白酶抑制劑混合物包含6種獨(dú)立的蛋白酶抑制劑；每一種抑制劑可特異性抑制某一種或幾種蛋白酶活性。該混合物優(yōu)化的組成使其可以抑制幾乎所有重要的蛋白酶活性，包括蛋白酶、半酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶等。
8、 本試劑盒中不有EDTA，與金屬螯和層析等兼容。
細(xì)胞名稱 胚肺成纖維細(xì)胞；IMR-90
形態(tài)特性: 成纖維細(xì)胞
生長特性: 貼壁生長
特征特性: W.W.Nichols及其同事從一位16周女嬰的肺中取材，建立了人二倍體成纖維細(xì)胞株IMR-90。分裂潛能，病毒感受性和其它性質(zhì)都得到了充分研究，因而這株細(xì)胞可以作為WI-38或其它標(biāo)準(zhǔn)人肺細(xì)胞株的替代株。有報(bào)道稱這株細(xì)胞在表現(xiàn)出衰老前可倍增58次。
培養(yǎng)條件: MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%
傳代方法: 消化3-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長滿。
傳代情況: P(11+5)
凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測: 陰性
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產(chǎn)品名稱 | 胚肺成纖維細(xì)胞；IMR-90 |
生長特性 | 貼壁生長 |
貨號 | EY-X63904 |
我司常期代理ATCC Acris abcam cst Biorbyt santa Novus sigma lifespan NEB roche ABI R&D millipore BD Qiagen Cayman Jackson Life GeneTex Bio-Rad DSHB tocris peprotech 等品牌；部分產(chǎn)品現(xiàn)貨，超低比價(jià)，產(chǎn)品名稱貨期短，價(jià)格優(yōu)，售后齊全。
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明：
1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
操作流程：
1.1主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動(dòng),使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預(yù)熱，8～10倍體積）離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi)，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細(xì)胞48h換液1次，細(xì)胞長至60%～70%融合時(shí)，用0.25%消化1～2min，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮、分散，為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細(xì)胞懸液，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻，吸管分裝混合液，傳代擴(kuò)增細(xì)胞。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細(xì)胞的計(jì)數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞，待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計(jì)數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液，用10×物鏡觀察計(jì)數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù)，按公式計(jì)算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液＝(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生的細(xì)胞，以0.25％消化成單細(xì)胞懸液，計(jì)數(shù)后分別接種于12個(gè)25cm2培養(yǎng)瓶中，每兩小時(shí)隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞，加入胰消化酶消化、計(jì)數(shù)已貼壁細(xì)胞，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ，計(jì)算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數(shù)生的細(xì)胞用消化制成單細(xì)胞懸液，以1×104/孔接種于24孔板，每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機(jī)取3孔，計(jì)數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計(jì)算平均值。
培養(yǎng)操作步驟 ：
1．用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個(gè)平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí)；
4．將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí)，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。
下調(diào)膜聯(lián)蛋白 A2檢測試劑盒細(xì)胞名稱: Cas9穩(wěn)定
L-谷氨酰叔丁酯鹽酸鹽Phospho-ALK (Tyr1278) Antibody氟吡啶鹽酸鹽
L--5-叔丁酯-1-甲酯鹽酸鹽TGF-β Antibody2,二溴嘧啶
N-芐基鹽酸鹽IRP2 (D6E6W) Rabbit mAb2,二芐
芐酯鹽酸鹽Phospho-ALK (Tyr1282/1283) Antibody甲氧基肼鹽酸
L-異酯對磺酸鹽Pro-TGF-alpha Antibody1-Boc-甲氨基哌啶
L-異叔丁酯鹽酸鹽HIF-1α Antibody六氟
L-賴氨酸酯Phospho-LSD1 (Ser131) Antibody氨基-2-三氟甲 酸
L-賴氨酸甲酯鹽酸鹽GNB3 Antibody5-氟-2-硝基三氟甲
L-蛋氨酸甲酯鹽酸鹽Pin1 Antibody5-羥基香草
膽固硫酸酯鈉鹽MST3 Antibody1,9-壬二
O-叔丁基-L-甲酯鹽酸鹽HA-Tag (C29F4) Rabbit mAb-3,5-二硝基三氟甲
L-甲酯鹽酸鹽HA-Tag (C29F4) Rabbit mAb甲氧基酸酯
L-纈氨酰鹽酸鹽CD44 (E7K2Y) XP® Rabbit mAb基-2-氟吡啶
1,丁二雙鹽酸鹽CD44 (E7K2Y) XP® Rabbit mAb氟-2-甲酸
半胱鹽酸鹽Neuropilin-1 (D62C6) Rabbit mAb2-硝基-氟酚
甘氨酰鹽酸鹽Phospho-Ezrin (Thr567)/Radixin (Thr564)/Moesin (Thr558) (48G2) Rabbit mAb鄰氟甲酸甲酯
L-羥甲酯鹽酸鹽Phospho-Ezrin (Thr567)/Radixin (Thr564)/Moesin (Thr558) (48G2) Rabbit mAb香草酸甲酯
D-甲酯鹽酸鹽TNF-R2 Antibody3,二羥基甲酸酯
L-甲酯鹽酸鹽TNF-R2 Antibody2-氟-甲氧基甲酸
D-氨酸酯鹽酸鹽Sox2 (C70B1) Rabbit mAb (IHC Preferred)()-羥基哌啶
利格列汀;利拉利汀OSR1 Antibody1-(2-)哌
L--α-芐酯Caspr2 Antibody1-芐基-氧雜-哌啶甲酸酯
L-酯鹽酸鹽GP130 Antibody1-甲酰基-甲基哌
L-氨酸芐酯對甲磺酸鹽Phospho-MLKL (Ser345) (D6E3G) Rabbit mAb2-(三氟甲基)芐溴
L-氨酰鹽酸鹽NPRL2 (D8K3X) Rabbit mAb哌啶-甲酰
L-鹽酸鹽NF-κB2 p100/p52 (D7A9K) Rabbit mAb四溴噻吩
L-高鹽酸鹽MCM7 (D10A11) XP® Rabbit mAb對溴芐
氨基酸甲酯鹽酸鹽MCM7 (D10A11) XP® Rabbit mAb1,1-環(huán)烷二甲
TPCK(進(jìn)分)TNF-R1 (C25C1) Rabbit mAb-甲酸
TPCKTNF-R1 (C25C1) Rabbit mAb-2-氨基吡啶
D-纈氨酰-L-亮氨酰-L-賴氨酸-對-PHF8 (E9R4F) Rabbit mAb2-氨基-間二甲酸
谷二肽,L--谷二肽,力肽SUZ12 (D39F6) XP® Rabbit mAb溴喹啉
L-甲酯SUZ12 (D39F6) XP® Rabbit mAbN-Boc-溴
D-氨酰鹽酸鹽Beclin-1 Antibody2--硝
硝酸芬替康唑; 硝酸芬康唑Myc-Tag (9B11) Mouse mAb (PE Conjuga)2-氨基-異鄰二甲酸
1-芐基D-SDF1 Antibody叔丁基化
胞；231-Cas9-549形態(tài)特性: 上皮樣Solute Carrier Family 27 Member 4
胚肺成纖維細(xì)胞；IMR-90柚皮素480-41-1英文名：Naringenin
英文別名：4'',5,7-Trihydroxyflavanone，naringetol
CAS登錄號：480-41-1
分子式：C15H12O5
分子量：272.25
分子結(jié)構(gòu)：
外觀：白色針狀結(jié)晶
規(guī)格：20 mg/支
純度：≥ 98%
用途：用于含量測定/鑒定/藥理實(shí)驗(yàn)等。
提取來源：漆樹科植物梗樹(Amacardi-um occidentale L.)果實(shí)的核殼等
溶解性：溶于乙醇、和，幾乎不溶于水。
熔點(diǎn)：247～250℃
藥理藥效：具有抗菌、抗炎、抗癌、解痙和利膽作用，臨床應(yīng)用于治療細(xì)菌感染，鎮(zhèn)靜、抗癌類。
貯存條件： 4℃冷藏、密封、避光
有效期： 2年
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