公司細胞廣泛用于國內(nèi)院校的細胞生物學研究,作為實驗項目研究。下列產(chǎn)品詳細介紹:
產(chǎn)品名稱 | 生長特性 | 貨號 |
肝癌細胞株;HepG2-RHBV | 貼壁生長 | EY-X63712 |
細胞名稱 肝癌細胞株;HepG2-RHBV
形態(tài)特性: 上皮細胞樣
生長特性: 貼壁生長
特征特性: 該細胞屬保藏,其特征特性尚未公開。
培養(yǎng)條件: RPMI1640(w/oHepes)10%FBS
傳代方法: 1:3傳代,3-4天傳1次
傳代情況: C5
凍存條件: 基礎培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測: 陰性
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冷凍保存細胞之方法
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
Indole-3-carboxylic acid
CAS No.:771-50-6
中文名:吲哚-3-羧
分子式:C9H7NO2
葉 訂購|咨詢 基質(zhì)金屬蛋白酶9(MMP9) 規(guī)格: HPLC≥98%;100mg
L瓜 訂購|咨詢 基質(zhì)細胞衍生因子1(SDF1) 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
五味子 訂購|咨詢 基質(zhì)細胞衍生因子1(SDF1) 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
7氧基莫諾苷 訂購|咨詢 基質(zhì)細胞衍生因子1(SDF1) 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
地榆皂苷I 訂購|咨詢 基質(zhì)細胞衍生因子1(SDF1) 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
氧芍藥苷 訂購|咨詢 基質(zhì)細胞衍生因子2(SDF2) 規(guī)格: BR,99%,有品;20mg
川續(xù)斷皂苷 訂購|咨詢 基質(zhì)細胞衍生因子2(SDF2) 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
白蠟樹素 訂購|咨詢 基質(zhì)細胞衍生因子4(SDF4) 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
亥茅苷 訂購|咨詢 基質(zhì)細胞衍生因子4(SDF4) 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
葫蘆巴 訂購|咨詢 基質(zhì)細胞衍生因子4(SDF4) 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
格洛甙C 訂購|咨詢 基質(zhì)重塑關聯(lián)蛋白5(MXRA5) 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
兩面針 訂購|咨詢 基質(zhì)重塑關聯(lián)蛋白8(MXRA8) 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
人參皂苷Rh2 訂購|咨詢 基膜聚糖(LUM) 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
羥基積雪草苷 訂購|咨詢 黃體激素(LH) 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
延胡索素 訂購|咨詢 黃體激素(LH) 規(guī)格: 滴定法≥98%;20mg
訂購|咨詢 黃體激素(LH) 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
二氫楊梅素 訂購|咨詢 黃體激素(LH) 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
黨參炔苷 訂購|咨詢 營養(yǎng)蛋白(TRO) 規(guī)格: HPLC≥98%;10mg
DEDD1 死亡效應結(jié)構域蛋白1抗體 現(xiàn)貨供應 0.2ml Tetracycline hydrochloride
DEDD2 死亡效應結(jié)構域蛋白2抗體 現(xiàn)貨供應 0.2ml Carbenicillin disodium
DIS/CCAR1 細胞周期及凋亡調(diào)節(jié)蛋白1抗體 現(xiàn)貨供應 0.2ml Carbenicillin disodium
DPF2/D4 zinc and double PHD fingers family 2 雙PHDD4鋅指蛋白2抗體 現(xiàn)貨供應 0.2ml Fenbendazole
DUSP22/JSP1 雙特異性酶22抗體 現(xiàn)貨供應 0.2ml Fenbendazole
FKBP38 FK506結(jié)合蛋白38抗體 現(xiàn)貨供應 0.2ml DCloprostenol sodium
FOXO1 + FOXO3 + FOXO4 叉頭蛋白O1/O3/O4抗體 現(xiàn)貨供應 0.2ml DLCloprostenol sodium
GADD45 gamma 生長抑制DNA損傷基因45γ抗體 GADD45γ 現(xiàn)貨供應 0.2ml Ligustrazine HCl
香豆內(nèi)酯 進口、國產(chǎn) 英文名稱:Coumarin 含量:IND,0.04%
香荊芥酚 進口、國產(chǎn) 英文名稱:Carvacrol 含量:AR,99%
香檸檬油 進口、國產(chǎn) 英文名稱:BergamotOil 含量:AR,99%
香葉基焦銨 進口、國產(chǎn) 英文名稱:GPP 含量:BR,97%
香葉 進口、國產(chǎn) 英文名稱:Citral 含量:AR,99%
橡膠促進劑D 進口、國產(chǎn) 英文名稱:DPG 含量:AR,98%
消炎痛 進口、國產(chǎn) 英文名稱:Indomethacin 含量:生物技術級
呋妥因 進口、國產(chǎn) 英文名稱:Nitrofurantoin 含量:超純,99%
基間二雜茚 進口、國產(chǎn) 英文名稱:5Nitrobenzimidazole 含量:氣體分析
小分子MARK 進口、國產(chǎn) 英文名稱:ProteinlittleMWmarker 含量:BR,5u/mg
肝癌細胞株;HepG2-RHBV厭氧菌液體培養(yǎng)基規(guī)格:250g用途:用于厭氧菌培養(yǎng)、增菌、菌種保存使用
水楊素(進口)規(guī)格:10g用途:微生物指示劑
腦心浸出液肉湯(BHI)顆粒規(guī)格:250g用途:用于細菌的增菌培養(yǎng)或純化培養(yǎng)(GB標準)
GYP白亞瓊脂培養(yǎng)基規(guī)格:250g用途:用于乳菌的分離培養(yǎng)
A1培養(yǎng)基規(guī)格:250g用途:用于檢測水中的大腸菌群(US-EPA標準)
營養(yǎng)肉湯規(guī)格:250g用途:用于試驗(GB4789.14-2014)
操作步驟:
1、貼壁細胞的消化
①吸除培養(yǎng)液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量生物 Trypsin-EDTA solution,略蓋過細胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細胞消化時間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化;或者用槍吹打細胞發(fā)現(xiàn)細胞剛好可以被吹打下來,吸除細胞消化液。加入含血清的 *細胞培養(yǎng)液,吹打下細胞,即可直接用于后續(xù)實驗。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細胞消化時間過長,未及吹打細胞,細胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用細胞培養(yǎng)液把細胞全部吹打下來。1000~2000g 離心 1min,沉淀細胞,盡量去除細胞消化液后,加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細胞,即可用于后續(xù)實驗。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。