產品特點:
1、 使用方便:不需昂貴設備。
2、 可以處理各種細菌菌體，包括新鮮菌液和冰凍菌體。
3、 將蛋白提取的時間縮短至30分鐘-1小時。
4、 采用溫和的中性裂解組分，保持蛋白活性。
5、 含蛋白穩(wěn)定劑，提取的蛋白穩(wěn)定。
6、 紫外檢測蛋白濃度時，背景干擾低。
7、 蛋白酶抑制劑抑制了蛋白的降解，蛋白酶抑制劑配方優(yōu)化。蛋白酶抑制劑混合物包含6種獨立的蛋白酶抑制劑；每一種抑制劑可特異性抑制某一種或幾種蛋白酶活性。該混合物優(yōu)化的組成使其可以抑制幾乎所有重要的蛋白酶活性，包括蛋白酶、半酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶等。
8、 本試劑盒中不有EDTA，與金屬螯和層析等兼容。
細胞名稱 結直腸腺癌上皮細胞；DLD-1
形態(tài)特性: 上皮細胞
生長特性: 貼壁生長
特征特性: DLD-1是1977-1979年間D.L.Dexter和同事分離的兩株結直腸腺癌細胞株中的一株。在ATCC和其它地方進行的DNAfingerprinting和染色體組型分析表明這株細胞與HCT-15(CCL-225)相似，說明這兩者是來自同一個人的不同。他們的遺傳起源可通過DNAfingerprinting證實，但染色體組型分析顯示它們缺乏染色體標記一致改變或數目上一致改變。細胞的CSAp陰性(CSAp-)。DLD-1細胞的p53抗原表達呈陽性(p53抗原產生了一個C->T點突變導致241位的Ser-
培養(yǎng)條件: RPMI1640(w/oHepes)優(yōu)質胎牛血清，10%
傳代方法: 消化3-5分鐘。1:2。3天內可長滿。
傳代情況: PN5
凍存條件: 基礎培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測: 陰性
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產品名稱 | 結直腸腺癌上皮細胞；DLD-1 |
生長特性 | 貼壁生長 |
貨號 | EY-X63573 |
我司常期代理ATCC Acris abcam cst Biorbyt santa Novus sigma lifespan NEB roche ABI R&D millipore BD Qiagen Cayman Jackson Life GeneTex Bio-Rad DSHB tocris peprotech 等品牌；部分產品現(xiàn)貨，超低比價，產品名稱貨期短，價格優(yōu)，售后齊全。
實驗要點及說明：
1．本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細胞培養(yǎng)，懸浮細胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質玻璃，并經過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率；
5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
操作流程：
1.1主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293細胞的復蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細胞的復蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預熱，8～10倍體積）離心管內,稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細胞48h換液1次，細胞長至60%～70%融合時，用0.25%消化1～2min，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散，為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細胞懸液，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻，吸管分裝混合液，傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細胞的計數 常規(guī)消化細胞，待細胞變圓、脫壁并浮起，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數板蓋玻片的一側加微量細胞懸液，用10×物鏡觀察計數板四角大方格細胞數，按公式計算出細胞數。細胞數/ml原液＝(四方格細胞數之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數生的細胞，以0.25％消化成單細胞懸液，計數后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中，每兩小時隨機取出3瓶細胞，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細胞，加入胰消化酶消化、計數已貼壁細胞，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細胞數/接種細胞數) ，計算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數生的細胞用消化制成單細胞懸液，以1×104/孔接種于24孔板，每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機取3孔，計數每孔細胞的數目并計算平均值。
培養(yǎng)操作步驟 ：
1．用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時；
4．將經過計數的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
Homo sapiens, human細胞名稱: 小鼠雜交瘤細胞株；W5 MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)10%FBS
Yarrowia lipolytica (Wickerham et al.) van ..細胞名稱: 小鼠雜交瘤細胞株；CR-M01 MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)10%FBS
Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hans ..細胞名稱: 小鼠雜交瘤細胞株；8G3-B5-SP20 MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)10%FBS
Fusarium avenaceum (Corda : Fries) Saccardo ..細胞名稱: 小鼠雜交瘤細胞株；6B3-C5-SP20 MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)10%FBS
Bacillus subtilis (Ehrenberg) Cohn細胞名稱: 小鼠雜交瘤細胞株；3553-1hz-6M456/4B7_111202 MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)10%FBS
freeze-dried細胞名稱: 小鼠雜交瘤細胞株；3553-1hz-6M456/1J4_111128 MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)10%FBS
Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hans ..細胞名稱: 小鼠雜交瘤細胞株；5737-1RE-4M4/4N5_111218 MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)10%FBS
Trichurus spiralis Hasselbring, anamorph細胞名稱: 小鼠雜交瘤細胞株；5163-1RE-4M1234/4L17_111016 MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)10%FBS
Bifidobacterium sp.細胞名稱: 小鼠雜交瘤細胞株；DES1B7 MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)10%FBS
Mus musculus, mouse細胞名稱: 小鼠雜交瘤細胞株；MT9C10 MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)10%FBS
Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hans ..細胞名稱: 人膽管癌細胞；LIPF178C MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)10%FBS
Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hans ..細胞名稱: 小鼠雜交瘤細胞株；DCBX5B1 MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)10%FBS
Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hans ..細胞名稱: 小鼠雜交瘤細胞株；8D6 MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)10%FBS
dried細胞名稱: 小鼠雜交瘤細胞株；NT4D12 MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)10%FBS
Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hans ..細胞名稱: 小鼠雜交瘤細胞株；DMEQ1A3 MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)10%FBS
Mus musculus (B cell); Mus musculus (myeloma ..細胞名稱: 小鼠雜交瘤細胞株；DBP3B2 MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)10%FBS
結直腸腺癌上皮細胞；DLD-1人肝脂酶(HL)ELISA試劑盒TAPELISAKit產品規(guī)格:48T/96T。
人可溶性腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體(sTRAIL)ELISA試劑盒TAPELISAKit產品規(guī)格:48T/96T。
人癌胚抗原(CEA/CD66)ELISA試劑盒TAPELISAKit產品規(guī)格:48T/96T。
人前列腺特異性抗原(PSA)ELISA試劑盒TAPELISAKit產品規(guī)格:48T/96T。
人游離前列腺特異性抗原(fPSA)ELISA試劑盒TATELISAKit產品規(guī)格:48T/96T。
人甲種胎兒球蛋白/甲胎蛋白(AFP)ELISA試劑盒TATELISAKit產品規(guī)格:48T/96T。
人卵巢癌標志物CA125ELISA試劑盒TATELISAKit產品規(guī)格:48T/96T。
人癌標志物-CA153ELISA試劑盒TB-AbIgGELISAKit產品規(guī)格:48T/96T。
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